[目的] 通过测序法分析兰考泡桐与白花泡桐和毛泡桐在叶绿体rps16序列上的遗传差异,旨在分析三者之间在叶绿体基因上的变化特点和规律,探讨其种间的遗传关系。[方法] 选取兰考泡桐、白花泡桐和毛泡桐各15个样本,对其提取的DNA用PCR扩增获得特异片段,并将其纯化与测序。利用软件Clustal X 2.0对所得序列进行排序;运行MEGA 4软件,进行多序列比对,分析其序列特征,并计算出K2P遗传距离。[结果] (1)对获得的rps16序列进行测定分析,得兰考泡桐序列长度分别为932~933 bp;白花泡桐序列长度为932 bp;毛泡桐序列长度分别为916~918 bp。对所得rps16序列进行排序后的长度为938 bp,平均GC含量为34.31%。3个种所代表的个体之间共有10个变异位点,占整个序列长度的1.07%。其中有9个变异位点属于碱基插入或缺失类型,占变异位点总数的90%,占整个序列长度的0.96%。有1个变异位点属于碱基替换类型,占整个变异位点总数的10%,占整个序列长度的0.11%。(2)整个rps16片段的序列共有10个变异位点,其中兰考泡桐与白花泡桐在总的变异位点上,具有一致的碱基位点9个,占总变异的90%。而兰考泡桐与毛泡桐相比,没有相同的碱基。[结论] 根据三种泡桐的rps16序列的序列特征和变异位点的分析,表明在叶绿体遗传方面,兰考泡桐具有与白花泡桐更多相似的遗传物质,其亲缘关系较近。综上所述,推测兰考泡桐与白花泡桐可能来自同一母系遗传。

目的 以701份杜仲种质资源为研究对象，探究杜仲种质资源叶片表型性状遗传多样性，为杜仲优良资源选育和开发利用提供理论支撑和材料。 方法 对杜仲叶片14个表型性状进行测定，结合相关性分析、主成分分析和聚类分析等统计方法，探究杜仲不同种质间叶片表型的遗传多样性。 结果 不同来源地杜仲叶片的14个表型性状间存在较大差异，叶面积变异系数最大（20.68%），叶绿素参考值变异系数最小（4.57%）；各表型性状的遗传多样性指数为 1.90～2.09，叶片长和叶柄长的遗传多样性指数最大，均为2.09；叶片表型性状间呈极显著正相关的有26对，呈极显著负相关的有19对，叶片长、叶片宽、叶面积、叶周长、叶柄长5个性状间均呈极显著正相关。主成分分析提取的6个主成分，累积贡献率达89.211%。基于14个表型性状，将701份杜仲种质划分为4类，各类群间叶片表型性状存在较大差异。 结论 杜仲种质资源叶片表型性状表现出丰富的多样性，筛选出叶面积、鲜比叶质量、叶片绿色成分、叶绿素参考值、长宽比、节间距6个性状可作为评定杜仲资源的主要表型指标，为叶用杜仲良种选育及综合利用提供了优异的种质基础。

目的 分析杜仲种质资源果实性状变异规律并进行综合评价，为杜仲良种选育和开发利用提供理论依据和遗传材料。 方法 基于我国18个省（市、区）331份杜仲种质资源，针对杜仲果实19个主要性状，采用相关性分析、聚类分析和主成分分析等方法，分析果实性状变异状况，评价并筛选优良种质。 结果 杜仲果实性状变异系数为4.64%~25.79%，平均变异系数为12.65%，变异系数较高的为包裹种仁果皮百粒质量(25.79%)、种仁百粒质量(22.32%)、种仁体积指数(22.02%)、果实体积指数(19.53%)，变异系数较小的为亚麻酸(4.64%)、油酸(5.78%)、果型指数(8.04%)。果实性状遗传多样性指数介于1.6572~2.0947，平均为2.0234。果实百粒质量与果实体积指数、种仁百粒质量等性状呈极显著正相关，杜仲橡胶含量与包裹种仁果皮百粒质量、果实侧径均呈极显著正相关，与种仁粗脂肪含量呈显著负相关。聚类分析将杜仲种质资源划分为3个类群，类群Ⅰ为小果型类群，类群Ⅱ为中型果类群，类群Ⅲ为大果型类群，初步明确杜仲种质果实不同类型。通过主成分分析，前7个主成分累积贡献率达85.169%，表明这7个主成分代表了杜仲果实性状的大部分信息，针对油用、橡胶用和综合利用等不同用途进行评价，分别筛选出10份最优种质。 结论 杜仲种质资源果实性状表现出丰富的变异，以包裹种仁果皮百粒质量、种仁百粒质量等产量指标变异最大，为杜仲优良种质选育提供了可能，针对不同用途筛选的杜仲最优种质，为我国杜仲良种选育及综合利用提供了优异的种质基础。

采用选择典型样株和随机取样的方法,对杜仲果实含胶特性的个体变异规律及其与若干宏观性状的相关性进行了系统研究。结果表明,无性系间的果长、果宽、果厚、果形指数、果实千粒质量、果皮含胶率、果实含胶率和单果含胶量都存在极显著差异。在供试的35个无性系中,果皮含胶率极显著高于对照的有14个无性系,果实含胶率极显著高于对照的有15个无性系;无性系果实含胶率和果皮含胶率与果实主要形态性状的相关性均未达到显著水平,而单果含胶量则与果长、果宽、果厚、果实千粒质量的相关性均达到了极显著水平,与果皮含胶率和果实含胶率的相关性也达到了极显著水平。

采用选择典型样株和随机取样的方法,对杜仲皮含胶特性的个体变异规律及其与若干宏观性状的相关性进行了系统研究。结果表明,不同无性系的胸径、树皮厚度、树皮含胶率的差异均达到了极显著水平。杜仲无性系树皮的含胶率与木栓层厚度和木栓层占树皮厚度的百分比呈极显著的负相关关系,与胸径的大小呈显著的负相关关系。胸径生长量越大,木栓层越厚,杜仲胶的积累相对越少;杜仲胶密度与树皮含胶率和树皮密度呈极显著的正相关关系。

To establish a HPLC method to determine the content of aucubin in Eucomm ia ulm oides seeds, to searchfor the formation and accumulation of aucubin in Eucomm ia ulm oides seeds, and to p rovide foundation for thesuitable harvest season of aucubin in Eucomm ia ulm oides seeds, the Hypersil GLOD2C18 column ( 250 mm ×4. 6mm, 5μm)with temperature at 25 ℃was used. The mobile phase wasmethanol-water (8∶92), at a flow rate of 1. 0mL·min-1, and the detective wavelength was 206 nm. The results indicated that the method of HPLC was efficient, and the average recovery of the aucubin in Eucomm ia ulm oides seeds was 98. 61%, RSD = 1. 14% ( n = 6). Thedetermination of aucubin was gradually raised with the seed growth, while the formation and accumulation from June25 th to Sep tember 5 th increased slowly, and the determination of aucubin from Sep tember 5 th to 25 th raisedquickily, and then kep t relatively stable. Considering the extraction and utilization of aucubin, the date fromSep tember 25 th to October 25 th was the most suitable period for collecting Eucomm ia ulm oides seeds.

采用反相高效液相色谱法测定了不同变异类型杜仲皮中几种关键活性成分的含量,结果表明:4种变异类型杜仲皮中5种不同活性成分的含量及组成比有较大差异,其中京尼平苷酸(GPA)、京尼平苷(GP)、松脂素二糖苷(PDG)、绿原酸(CA)含量以及5种成分的总含量以光皮型和浅纵裂型杜仲皮较高,而龟裂型和深纵裂型活性成分总体含量较低。若遴选优质杜仲药用资源,可首先考虑从优良光皮型和浅纵裂型杜仲群体中开展选育工作。

以杜仲叶片cDNA为模板,采用反转录RCR及RACE技术分离出DXR基因cDNA全长。序列分析结果表明该基因序列全长1 814 bp,共编码478个氨基酸,推导的蛋白质分子量为51.71 kD,理论等电点5.79,命名为EuDXR。推导的EuDXR蛋白质序列具有植物DXR酶的5个典型基序,并预测出26个潜在的功能位点。系统进化树分析表明EuDXR蛋白与玉米、水稻亲缘关系最近,其次为橡胶、拟南芥、烟草。

In order to set up the genetic diversity system of Eucommia ulmoides Oliver based on SSR molecular markers, the establishment of SSR-PCR reaction system and screening out SSR marker primer showing high polymorphism were studied. A L9(34) orthogonal design was performed to optimize the main factors of the SSR-PCR reaction system. The results indicated that the best SSR-PCR reaction system for E.ulmoides was DNA template 1 μL (30~60 ng·μL-1), 2×Taq PCR Master Mix 10 μL, primer 1 μL with the total volume of 25 μL. The PCR reaction system had high stability and repeatability, the pairs of SSR primers with high polymorphism were gotten. The 8 E.ulmoides samples' DNA sequence was amplified with 13 pairs of SSR primers by SSR-PCR technique, 34 alleles were detected, 2.6 alleles were detected from per site on average. Each allele's effective number was 1.751 5, and the h value was 0.379 8, the average I value was 0.643 3. This study is helpful in using SSR molecular marker to analyze genetic diversity and genetic relationship in E. ulmoides.

以杜仲叶片cDNA为模板,采用反转录RCR及RACE技术分离出HDR基因的cDNA克隆,命名为EuHDR。EuHDR基因cDNA全长1 653 bp,5’端非编码区长82 bp,3’端非编码区长188 bp,编码460个氨基酸,与喜树HDR基因序列相似性最高,达82%;推导EuHDR氨基酸序列中包含转运肽序列(A1-A33)及植物HDR蛋白多个保守的功能位点(A117,A208,A262,A345);EuHDR蛋白二级结构α-螺旋占35.65%,β-折叠占19.78%,螺环结构占44.57%;EuHDR蛋白三级结构为单体形式,呈不规则的三叶草形状;系统进化分析表明EuHDR蛋白与葡萄HDR蛋白的亲缘关系最为接近。